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相差顯微鏡,又稱相襯顯微鏡,多用于觀察活細(xì)胞或者不染色的組織切片,有時(shí)也可用于觀察缺少反差的染色樣品。它是利用物體不同結(jié)構(gòu)成分之間的折射率和厚度的差別,把通過物體不同部分的光程差轉(zhuǎn)變?yōu)檎穹ü鈴?qiáng)度)的差別,經(jīng)過帶有環(huán)狀光闌的聚光鏡和帶有相位片的相差物鏡實(shí)現(xiàn)觀測(cè)的生物顯微鏡。
鏡檢時(shí),光源只能通過環(huán)狀光闌的透明環(huán),經(jīng)聚光鏡后,這束光線通過被檢物體,因各部分的光程不同,光線將發(fā)生不同程度的偏斜(衍射)。由于透明圓環(huán)所成的象恰恰落在物鏡后焦點(diǎn)平面上,并和相板的共軛面重合。因此,未偏斜的直射光便通過共軛面,而發(fā)生偏斜的衍射光則由補(bǔ)償面通過。由于相板的共軛面與補(bǔ)償面的性質(zhì)不同,它們分別將通過這兩部分的光線產(chǎn)生一定的相位差和強(qiáng)度的減弱,這樣兩組光線再經(jīng)后透鏡的會(huì)聚,又復(fù)在同一光路上行進(jìn),而使直射光和衍射光產(chǎn)生光的干涉,變相位差為振幅差。干涉的結(jié)果,有的是振幅的同向量,合成波增大,即相長(zhǎng)干涉,此部分便明亮;有的是振幅的異向量,合成波減少,即相消干涉,則此部分便暗淡。這樣在相襯鏡檢時(shí),通過無色透明物體的光線,使人眼不可分辨的相位差轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭煞直娴恼穹睢?/span>
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