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熒光免疫分析法是在熒光顯微鏡下,可以直接觀察呈現(xiàn)特異性熒光的抗原抗體復(fù)合物及其存在的位置。在實(shí)際工作中,由于熒光素標(biāo)記抗體檢查抗原的方法較為常用,所以一般通稱為熒光抗體技術(shù)。
時間分辨熒光免疫法是一種特殊的熒光免疫分析法,它是利用具有雙功能基團(tuán)結(jié)構(gòu)的螯合劑,將鑭系元素標(biāo)記到抗體(或抗原)上,經(jīng)免疫反應(yīng)形成復(fù)合物,由于鑭系元素能夠散發(fā)出熒光,故分離出去未結(jié)合的成分后,利用時間分辨熒光儀即可測定熒光強(qiáng)度,從而推測待測物的含量。
時間分辨熒光免疫法的特點(diǎn)如下:
1)采用脈沖光源(每秒閃爍1000次以上的氙燈),照射樣品后即短暫的熄滅;
2)以電子設(shè)備控制延緩時間,待非特異性本底熒光衰退后,再測鑭系熒光;
3)鑭系元素具有較長的熒光壽命,延緩測量時間,能有效地消除非特異性本底熒光(10ns)的干擾;
4)鑭系螯合物的激發(fā)光與熒光發(fā)射峰之間的波長差異,有利于排除非特異性熒光干擾,提高檢測特異性。
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