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生物顯微鏡是供醫(yī)療衛(wèi)生單位、高等院校、研究所用于微生物、細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察,可連續(xù)觀察細(xì)胞、細(xì)菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過(guò)程等。在細(xì)胞學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、遺傳工程學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)、植物學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。在環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域主要由以下幾種重要應(yīng)用。
細(xì)菌、霉菌檢測(cè)
細(xì)菌檢測(cè)如水中總大腸菌群檢測(cè)是環(huán)境監(jiān)測(cè)中的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。其復(fù)發(fā)酵后有一個(gè)革蘭氏染色鏡檢過(guò)程,這個(gè)相信大多數(shù)人都比較了解了,這里不再贅述。此外,利用生物顯微鏡做一些細(xì)菌或真菌的形態(tài)學(xué)鑒定在環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域內(nèi)也偶有出現(xiàn)(這類(lèi)應(yīng)用主要存在于衛(wèi)生部門(mén))。
生物群落檢測(cè)
1)浮游植物
浮游植物,具有色素或色素體能吸收光能和二氧化碳進(jìn)行光合作用制造有機(jī)物,營(yíng)浮游生活的微小藻類(lèi)的總稱,是水域的初級(jí)生產(chǎn)者。隨著太湖藍(lán)藻的大規(guī)模報(bào)道,環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域掀起了一陣對(duì)水華的研究熱潮。而無(wú)論是生態(tài)調(diào)查抑或是抑藻方法的研究工作,都離不開(kāi)對(duì)浮游植物的定性定量分析。鏡檢是浮游植物檢測(cè)中zui為傳統(tǒng)也是目前公認(rèn)性zui高的檢測(cè)方法(也有用分子生物學(xué)方法做的),也是環(huán)境監(jiān)測(cè)部門(mén)中檢測(cè)藻類(lèi)的zui主要技術(shù)手段。其檢測(cè)主要是依靠技術(shù)人員的經(jīng)驗(yàn),需要技術(shù)人員 有扎實(shí)的藻類(lèi)分類(lèi)學(xué)功底,對(duì)生物顯微鏡要求不是太高。
2)浮游動(dòng)物
浮游動(dòng)物是體形細(xì)小,且缺乏或僅有微弱的游動(dòng)能力,主要以漂浮的方式生活在各類(lèi)水體中的動(dòng)物的總稱。主要由原生動(dòng)物、輪蟲(chóng)、枝角類(lèi)、橈足類(lèi)組成。許多浮游動(dòng)物對(duì)環(huán)境變化的反應(yīng)比較敏感,可作為水質(zhì)的指示生物,所以在水污染調(diào)查中,浮游動(dòng)物也常作為主要研究對(duì)象之一。在浮游動(dòng)物的檢測(cè)中,類(lèi)似于浮游植物的檢測(cè),是根據(jù)顯微鏡下生物的形態(tài)來(lái)確定其種類(lèi)。在檢測(cè)過(guò)程中原生動(dòng)物和輪蟲(chóng)可用普通生物顯微鏡觀察,而枝角類(lèi)、橈足類(lèi),特別是海水樣品,經(jīng)常需要借助體視顯微鏡(解剖鏡)來(lái)觀察生物的某一部分特征。
3)其他生物菌落的檢測(cè)
如著生生物檢測(cè)和底棲動(dòng)物的部分種類(lèi)鑒定中需要用生物顯微鏡進(jìn)行觀察。
特殊物質(zhì)檢測(cè)
1)石棉塵的檢測(cè)
環(huán)境監(jiān)測(cè)中檢測(cè)的石棉塵是指溫石棉(白石棉)、鐵石棉(褐石棉)及青石棉(藍(lán)石棉)等石棉塵中能被吸入并沉著肺泡內(nèi)的呼吸性石棉纖維。檢測(cè)中,用高倍鏡(40×)計(jì)數(shù)長(zhǎng)度大于5um,寬度小于3um,長(zhǎng)寬比大于3:1的石棉纖維。
2)二噁英的檢測(cè)
二噁英是一種是無(wú)色無(wú)味的脂溶性物質(zhì),所以非常容易在生物體內(nèi)積累。它們能干擾機(jī)體的內(nèi)分泌,產(chǎn)生廣泛的健康影響。二噁英的測(cè)試方法很多,其中有一種利用離體大白鼠肝癌細(xì)胞的EROD誘導(dǎo)指示二惡英的復(fù)合毒性效應(yīng)的方法在環(huán)境監(jiān)測(cè)部門(mén)也有應(yīng)用。
EROD(7-ethoxyresorufin-O-deethylase)的活性反應(yīng)是極具代表性的混合功能氧化酶的典型反應(yīng)。通常把肝臟EROD酶活力誘導(dǎo)作為測(cè)試混合功能氧化酶(mixed-function oxidases, MFOs)誘導(dǎo)物毒性效力的指標(biāo)。
其中大鼠肝癌細(xì)胞在使用前需要鏡檢確定其復(fù)蘇情況以及使用量。這里一般使用倒置生物顯微鏡進(jìn)行觀察。一般選用相差物鏡,這種方法提供帶有自然背景色的、高對(duì)比度的、高清晰度的圖像,是觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞的理想選擇。
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